蛋白純化系統日常維護那些事
近日,“老祖宗的教誨”系列火出了圈,早先傳統文化里輸出的淺顯易懂且實用的道理,多少年鮮有人留意和傾聽。而今,借助AI技術“復活”老祖宗來重新復述和講解,聽上去確實有***番道理,有種溫故而知新的感覺。
儀器維護之道,亦如先賢智慧,貴在知行合***。實驗室小伙伴們是不是通常會忽略***些簡單卻關鍵的注意事項?縱使使用手冊事無巨細,若使用者未給予足夠重視,或交接時疏于詳盡溝通,久而久之,儀器的損耗便如暗流積聚,終有***日徹底“抱恙”——實驗停滯、項目受阻,更需承擔高昂的維修代價,屆時追悔莫及。
這里就以英賽斯公司AutoPure蛋白純化系統為例,簡要敘述儀器的日常維護和啟停注意事項(其它品牌蛋白純化系統亦可借鑒),愿諸君防患于未然,使儀器歷久彌新。
01 日常維護 每天 整機流路部分 ◇ 清潔擦拭外表,防止溶液結晶鹽腐蝕設備外表面以及元器件; (Ps:***些嚴重的儀器外觀腐蝕生銹,往往從日常濺液滯留開始的。) ◇ 溶液和樣品需過膜,推薦使用孔徑0.45μm或相當的濾膜過濾,此操作可有效防止流路堵塞、層析柱填料及檢測器臟污損壞。 ◇ 檢查系統管路和接頭是否存在破損,特別注意Peek管是否有壓折(內徑大的peek管更易彎折,如1mm白管);防止滲漏,超壓,樣品損失,層析柱損壞。 ◇ 系統使用完畢后,需用純水將系統沖洗干凈至各基線平穩,隨后使用20%乙醇清洗系并保存所有流路,防止流路長菌及性能下降。在使用含鹽緩沖液和20%乙醇保存液中間需間隔純水的沖洗,防止混合產生的微氣泡滯留系統。 pH計 ◇ 使用前校正pH計(***定要先校正接近7的點) ◇ 使用后將pH計拆下,使用純水沖洗并擦拭干凈,浸入保護液(pH4.0飽和KCl溶液)保存 ◇ pH 電極前端由***個薄玻璃膜組成,避免磕碰、污染或干燥,否則會導致電極損壞。 系統泵 ◇ 每次使用前或更換緩沖液時,需從排空閥排出泵腔和管路里殘留的氣泡(使用大注射器緩慢抽出至少5ml液體),否則會影響流速的準確性,甚至導致泵無法正常出液。 每周 整機流路部分 ◇ 緩沖液入口濾網的檢查和清潔,如果臟污較明顯,可拆下濾網進行超聲清洗。 ◇ 檢查泵后潤洗液,確認是否存在顯著增加或減少,同時觀察是否渾濁,如有異常,需更換潤洗試劑(20%乙醇),并重新做好液位標記。 每月 整機部分 ◇ 使用1M NaOH溶液,AB泵各50%,以系統***大流速的10%沖洗約20分鐘,隨后立即用純水將NaOH沖洗干凈(電導值趨向于0)。 ◇ 使用75%乙醇溶液,AB泵各50%,以系統***大流速的10%沖洗約2分鐘,隨后用純水將乙醇溶液沖洗干凈。 ◇ 在線濾膜拆卸后用0.5M NaOH超聲清洗10分鐘。 背壓閥 ◇ 通過在線/拆除對比的方式,檢查背壓閥壓力參數(5ml/min流速下0.14MPa±0.05MPa),如有高于設置值情況,可超聲清洗、調節或者更換。如有疑問,建議咨詢當地售后工程師。 每半年 壓力檢測器 ◇ 零點檢查:斷開壓力傳感器前端及后端接頭,檢查顯示的壓力數值,如果不在零點且誤差超過±0.02MPa,聯系售后工程師進行上門校準。 紫外檢測器 ◇使用注射器將10%的表面活性劑(如Decon90 , SDS等)注入紫外流動池,來回抽吸若干次,停留20分鐘后,用純水沖洗干凈。 ◇使用注射器注入乙醇或1M NaOH注入紫外流動池,來回抽吸若干次,停留20分鐘后,用純水沖洗。 pH/電導檢測器 ◇清洗流通池:拆下pH電極,安裝盲堵,用1M NaOH清洗pH流通池30分鐘,然后用純水沖洗。 ◇清洗pH電極(響應慢,頻發不準確時): 1.鹽沉積:0.1M HCl/ 0.1M NaOH/ 0.1M HCl交替洗數次,間隔5分鐘,中間使用水清洗電極; 2.油脂沉積:1%SDS清洗后進行水洗; 3.蛋白沉積:1%蛋白酶于0.1M HCl 溶液中清洗后進行水洗。 預防性保養 ? 對整個系統做***次全面細致的維護 ? 降